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细胞培养中牛血清使用攻略—四季青|浙江天杭生物科技股份有限公司
发布时间:2021-10-08 来源: 浏览量:2283

在做细胞研究中几乎离不开牛血清,选购和使用牛血清往往对于实验的顺利开展起到了关键的作用,但不少研究者对于牛血清还有不少疑问和误区。四季青作为从事牛血清生产和开发30余年的企业,谈谈我们对于牛血清应该如何使用和选购的见解,希望对您的实验有所帮助。

 

 

如何选择血清级别?

 

一般来说级别越高的血清对于细胞培养越有利,但价格相应的也越贵。在实验经费有限的情况下,全部使用最高级别的进口血清,有时候并不十分必要,反而降低了其他试剂、耗材的品质,增加了实验整体的风险。

因此四季青小助理建议您根据细胞的种类和血清试用结果选择相应的血清级别,一般来讲,级别稍低的血清对于特定细胞的培养效果不一定比高级别的血清差,具体培养效果还是得看试用结果。

 如果是干细胞、原代细胞等各种血清依赖度高的细胞及其他各类对血清质量有较高要求的实验研究,建议使用优质的胎牛血清来进行培养;

如果是对血清质量要求相对一般、增殖能力很强的细胞实验,采用品质合格的普通胎牛血清、类标准胎牛血清或新生牛血清也是可以的。

 

 

血清怎么保存和解冻?

 

四季青小助理建议您收到血清后根据外包装说明,通常保存在-10-30℃温度条件下,可保存五年。使用时将血清从冷冻箱取出后,置于28℃冰箱使之缓慢融解,一般过夜融解。若化冻后置于28℃环境中建议在两周内使用完。如果一次无法用完整瓶血清,可以根据使用情况将血清分装至多个无菌的容器中,冷冻保存,但在冻入低温冰箱前,必须留有一定空间,防止血清冰冻后体积增加导致容器破裂。直接购买小容量的免分装血清则是更保险的选择。

 

 

更换血清要注意什么?

 

更换血清时不要以为用的是同一品牌,同一货号的血清就可以万事大吉,血清由于是天然产物,批与批之间不可避免会存在差异,因此四季青小助理建议您在更换血清时先进行少量试用确保使用该批次的血清没有问题。在替换时采用逐步替换的方式,将新旧批次血清分别配制成培养基,按一定比例混合,待细胞适应后,完成新批号的替换。

条件允许的情况下最好一次性备足实验使用量的血清,避免因为频繁更换血清带来的风险和提升实验结果的稳定性。

 

 

血清到底要不要灭活?

 

血清热灭活主要目的是去除血清中的补体,但热灭活血清对大多数的细胞而言是不需要的,热灭活反而会使血清中沉淀增多。因此四季青小助理建议非特殊细胞就不需要进行热灭活了。

若确定您的细胞类型需要进行热灭活,那么请将化冻后的血清置于 56℃水浴中灭活30分钟,并通过摇晃使其受热均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多,甚至导致血清无法正常使用。

 

 

我的细胞怎么染菌了?

 

当发现培养的细胞有轻微染菌现象的时候先不要马上丢弃,因为有的时候并不是真正的染菌,而可能是由于热处理,配置时pH变化等原因导致的蛋白和无机盐持续析出,让研究人员误以为细胞被污染了。一般情况下沉淀并不会影响细胞的正常生长。
四季青小助理建议您在使用血清的时候,注意正确的血清解冻步骤,并尽量避免灭活血清及长时间的将血清置于高温环境中。

欲去除这些沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以1000/分~2000/分稍微离心,上清液即可直接加入培养基内使用。

若经过辨别细胞确实被污染了,那么应该对可能涉及的原因进行排查,对环境进行彻底消毒,相关器具、试剂、培养基停止使用,重新配制试剂培养基,对相关操作人员进行培训,然后重新复苏细胞。防止污染的二次发生。

 


如何选择血清品牌?

 

血清市场鱼龙混杂,有部分杂牌血清假冒进口血清,使用的原料存在着很大的疑问,用这些杂牌血清不仅价格不低,用于培养细胞还有风险。因此四季青小助理建议您尽量选择有长期稳定口碑的血清品牌,以保证实验的顺利进行。

正规公司出厂的牛血清都需要经过严格的多重质检和验证,除了细胞培养效果外还必须通过细菌、真菌、支原体、噬菌体、多种病毒以及各种性能测试,为科研人员提供保障。因此四季青小助理提醒您在选择血清品牌时同时也要关注该品牌是否具备牛血清生产的资质,以及牛血清的相关质量合格证明。

 

 

如何辨别假货?

 

由于牛血清造假比较容易,且不容易辨别,市场上流通着大量牛血清的假货,这些假货往往集中在一些售价高,比较好卖的进口知名品牌。若我们科研人员一旦买到了假货,会严重影响实验结果和进度。

为了尽可能避免买到假货血清,四季青小助理建议您选择有官方授权或确认可靠的经销商处采购血清,能很大程度降低买到假货的概率,条件允许的情况下从官方直接采购是最稳妥的选择。